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昆蟲黃粉蟲分解塑料是否產(chǎn)生微塑料



論文ID

原題:Microplastics Biofragmentation and Degradation Kinetics in the Plastivore Insect Tenebrio molitor

譯  名:塑料降解昆蟲黃粉蟲中的微塑料生物碎片化和降解動(dòng)力學(xué)

通訊作者:Wen-Xiong Wang

研究機(jī)構(gòu):esearch Centre for the Oceans and Human Health, City University of Hong Kong Shenzhen Research Institute, Shenzhen 518057, China

期刊:Environmental Science & Technology

時(shí)間:2024





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一、摘要


黃粉蟲腸道具有快速生物降解塑料的能力,但其動(dòng)力學(xué)未知。本文研究了不同微塑料(MPs):聚乙烯(PE)、聚氯乙烯(PVC)和聚乳酸(PLA)在黃粉蟲幼蟲中的生物碎片化和降解動(dòng)力學(xué)。使用聚集誘導(dǎo)發(fā)射 (AIE) 探針檢查MPs 生物降解的腸道反應(yīng)。研究結(jié)果表明,腸道生物碎片化率基本遵循PLA>PE>PVC的順序。MPs在黃粉蟲腸道中存在滯留效應(yīng),其中 PVC 需要最長(zhǎng)時(shí)間才能完全去除/消化??山到釳Ps的降解動(dòng)力學(xué)常數(shù)(PLA0.2108 h–1)顯著高于不可降解MPs(PE: 0.0675 h-1, PVC: 0.0501 h-1)。黃粉蟲幼蟲本能地調(diào)節(jié)了內(nèi)部消化環(huán)境,以響應(yīng)各種MPs的體內(nèi)生物降解。攝入 MPs 后,酯酶活性和腸道酸化程度均顯著增加。在PLA喂養(yǎng)和PVC喂養(yǎng)的幼蟲中,酯酶和酸化水平分別最高。黃粉蟲幼蟲的高消化酯酶活性和相對(duì)較低的酸化水平可能在一定程度上有助于更有效地去除MPs。這項(xiàng)工作為塑料降解昆蟲中 MPs 生物碎片化和腸道對(duì)體內(nèi) MPs 生物降解的響應(yīng)提供了重要的理解。




二、簡(jiǎn)介


塑料的使用導(dǎo)致塑料污染激增,引發(fā)擔(dān)憂。同時(shí),廢棄的塑料垃圾可以在自然環(huán)境中進(jìn)一步分解成微塑料(MPs,< 5 mm)和納米塑料(NPs,1-1000 nm)。產(chǎn)生的微(納米)塑料可以很容易地被生物體攝入,并因其獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì),沿著食物鏈轉(zhuǎn)移??山到馑芰希缇廴樗幔≒LA),已被用作石油衍生的不可降解塑料的替代品。然而,PLA的廣泛使用也導(dǎo)致了MNPs的大量產(chǎn)生。作為新出現(xiàn)的微粒人為污染物,與各種MNP相關(guān)的污染和生物毒性引起了更多的生態(tài)毒理學(xué)和健康問(wèn)題。


一些昆蟲幼蟲已被鑒定能夠快速攝入和生物降解各種塑料聚合物。Tenebrio molitor(黃粉蟲)的幼蟲成為研究塑料制品和MPs生物降解的重要模式生物。先前的研究強(qiáng)調(diào),黃粉蟲攝入塑料可以在腸道內(nèi)發(fā)生快速降解,這歸因于幼蟲宿主和腸道微生物的協(xié)同生物反應(yīng)。這種降解的半衰期相對(duì)較短,范圍為 3.4 至 16.6 小時(shí),具體取決于聚合物類型、結(jié)晶度和分子量,這比在細(xì)菌和真菌培養(yǎng)物中觀察到的降解更快。在通過(guò)黃粉蟲腸道后,幾乎一半的攝入聚合物可以在大約 8 至 24 小時(shí)的短保留時(shí)間內(nèi)有效地生物降解和礦化?;邳S粉蟲幼蟲在生物降解合成聚合物中的卓越表現(xiàn),歐盟委員會(huì)將黃粉蟲幼蟲介導(dǎo)的塑料生物降解指定為“未來(lái)100個(gè)激進(jìn)創(chuàng)新突破”之一。盡管黃粉蟲幼蟲的超快塑料生物降解已經(jīng)得到證實(shí), MPs的生物碎片化過(guò)程和降解動(dòng)力學(xué)仍然未知。


本文使用熒光標(biāo)記的 PE、PVC 和 PLA MPs 研究黃粉蟲幼蟲中不同 MPs 的生物碎裂和降解動(dòng)力學(xué)。本文首次證明,具有不同降解性的MPs在塑料降解無(wú)脊椎動(dòng)物的腸道中表現(xiàn)出明顯的滯留效應(yīng)。與持久性PE和PVC顆粒相比,PLA MPs可能表現(xiàn)出更高的碎裂率、去除效率和釋放率。進(jìn)一步合成了兩種功能化的生物相容性熒光探針,使用AIE技術(shù),揭示了腸道反應(yīng)如何影響塑料降解昆蟲中 MPs 的體內(nèi)生物降解。發(fā)現(xiàn)黃粉蟲幼蟲可以本能地調(diào)節(jié)其內(nèi)部消化環(huán)境,以響應(yīng)各種 MPs 的生物降解。研究結(jié)果有助于推進(jìn)對(duì)塑料降解無(wú)脊椎動(dòng)物中 MPs 生物碎片、降解動(dòng)力學(xué)以及腸道對(duì)體內(nèi) MPs 生物降解反應(yīng)的理解。




三、結(jié)果


1、MPs分子量分布的變化


通過(guò)使用凝膠滲透色譜(GPC)的分子量分析證實(shí)了聚合物的生物降解和解聚。PE、PVC和PLA中殘留聚合物的分子量分布與原始MPs相比發(fā)生了顯著變化,這些聚合物在通過(guò)黃粉蟲幼蟲的腸道后,PVC和PLA聚合物均表現(xiàn)出向低分子量方向的轉(zhuǎn)變(圖1)。相比之下,殘留的PE聚合物經(jīng)歷了向更高分子量的輕微轉(zhuǎn)變,這表明了一種典型的有限程度解聚模式,與以前Zophobas atratusGalleria mellonella幼蟲對(duì)PS泡沫進(jìn)行生物降解的報(bào)道一致。

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圖1. GPC分析表征攝入的PE、PVC和PLA MPs在黃粉蟲幼蟲中的分子量分布變化。



2、黃粉蟲幼蟲腸道中MPs的生物碎化和滯留效應(yīng)


使用激光掃描共聚焦顯微鏡在不同時(shí)間間隔(分別為 1、3、6 和 9 小時(shí))對(duì)攝入的 MPs 的生物碎片和定位進(jìn)行成像和可視化。激光共聚焦顯微成像顯示在攝入 MPs 1 小時(shí)后,所有攝入的 MPs 迅速穿過(guò)幼蟲前腸并進(jìn)入前中腸部分,這一觀察結(jié)果證實(shí)了黃粉蟲幼蟲快速消耗熒光標(biāo)記的MPs的有效能力。從實(shí)驗(yàn)的 3 小時(shí)開始,在 PE、PVC 和 PLA中都發(fā)現(xiàn)了明顯的生物碎裂。腸道滯留過(guò)程中的生物碎裂速率基本遵循PLA > PE > PVC的順序,與不可降解 MPs 相比,可降解MPs在塑料降解昆蟲幼蟲體內(nèi)的生物碎化更快。第6 小時(shí),在后中腸中檢測(cè)到碎片化的 PE 和 PVC MPs,在到達(dá)后中腸部分之前,已經(jīng)出現(xiàn)了 MPs 生物碎片。同時(shí),觀察到殘留的PLA顆粒到達(dá)黃粉蟲的后腸開始形成碎屑顆粒(排泄物)。與PVC MPs相比,觀察到PE MPs的生物碎裂相對(duì)較快。第9小時(shí),仍分別在后中腸和后腸中觀察到未消化的PVC和PE,PLA的消化過(guò)程幾乎完成,后腸中只剩下極少的PLA。


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圖 2. 通過(guò)激光掃描共聚焦顯微鏡觀察在不同時(shí)間間隔(1、3、6 和 9 小時(shí))攝入的 PE、PVC 和 PLA MPs 的生物碎裂。


進(jìn)一步研究了使用熒光標(biāo)記的 MPs 在攝入后 12、24、36、48 和 60 小時(shí)的間隔攝入的 MPs 可能的滯留效應(yīng)。結(jié)果顯示,與PLA MPs相比,PE和PVC MPs在塑料降解昆蟲中的保留率顯著更高。在36 小時(shí)后,用 PLA 喂養(yǎng)的幼蟲腸道樣本中均未檢測(cè)到殘留的 PLA MPs,而消除PE 和 PVC MPs 需要長(zhǎng)達(dá) 48 和 60 小時(shí)才能完全凈化。PVC MPs完全去除/消化的時(shí)間最長(zhǎng)。昆蟲幼蟲對(duì)PE聚合物的生物降解產(chǎn)生了多種脂肪族化合物,如直鏈烷烴、醇和不同鏈長(zhǎng)的脂肪酸,而PVC聚合物的生物降解釋放出直鏈烷烴以及含氯中間體和產(chǎn)物。這些降解化合物不具有生物相容性,可能導(dǎo)致塑料降解無(wú)脊椎動(dòng)物在腸道內(nèi)的粘性和滯留效應(yīng)。


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圖3. 攝入的PE、PVC和PLA MPs在生物降解過(guò)程中的保留效果、去除效率和降解動(dòng)力學(xué)。



3、腸道滯留過(guò)程中 MPs 的去除和降解動(dòng)力學(xué)


為了評(píng)估 PE、PVC 和 PLA MPs 在腸道滯留過(guò)程中的去除和降解動(dòng)力學(xué),本文量化了 MPs 攝入 1 小時(shí)后不同時(shí)間間隔(1、3、6、9 和 12 小時(shí))腸道中殘留塑料的重量(圖 3c-e)。結(jié)果顯示,可降解MPs的降解動(dòng)力學(xué)常數(shù)(PLA0.2108 h–1)明顯高于不可降解MPs(PE: 0.0675 h-1,PVC: 0.0501 h-1),進(jìn)一步證實(shí)與不可降解MPs相比,可降解MPs在消化道內(nèi)的生物碎化和降解速度更快。



4、腸道反應(yīng)有助于體內(nèi) MPs 生物降解


消化酯酶活性對(duì)各種MPs的攝入和生物降解表現(xiàn)出有效的反應(yīng)(圖4)。在攝入MPs的幼蟲的前中腸和后中腸(主要消化區(qū)域)中都觀察到酯酶活性水平升高。用MPs喂養(yǎng)的幼蟲的酯酶活性顯著高于有或沒(méi)有探針的麩皮喂養(yǎng)對(duì)照組的幼蟲(p < 0.001)。消化功能酶的濃度和分布在塑料降解昆蟲體內(nèi)的MPs相互作用下發(fā)生了顯著變化。此外,先前的研究表明,脂肪酶、幾丁質(zhì)酶、單加氧酶、雙加氧酶和其他酶可能參與不同聚合物的降解和礦化。未來(lái)的研究應(yīng)側(cè)重于開發(fā)高度靈敏的生物相容性探針,以在MPs生物降解過(guò)程中直接觀察這些酶的濃度和分布。


PLA喂養(yǎng)的幼蟲后中腸表現(xiàn)出最高水平的酯酶活性,而PE和PVC MPs喂養(yǎng)的幼蟲組的酯酶活性水平基本相當(dāng)。PLA喂養(yǎng)組后中腸中表現(xiàn)出的最高水平的酯酶活性可能與PLA聚合物在幼蟲腸道內(nèi)的更高降解性、消化率和去除效率有關(guān)。后中腸中酯酶活性的值高于前中腸的酯酶活性值,這也表明 MPs 聚合物的快速消化去除和礦化可能在后中腸中相對(duì)更明顯。這種現(xiàn)象可能歸因于攝入的 MPs 在前中腸區(qū)域發(fā)生的顯著生物碎裂,導(dǎo)致當(dāng)這些顆粒到達(dá)后中腸時(shí),產(chǎn)生具有更高比表面積的較小塑料顆粒。因此,消化功能酶(例如酯酶)的相對(duì)濃度相應(yīng)增加,加劇了生物降解和消化去除反應(yīng)。


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圖4. 黃粉蟲幼蟲腸道中酯酶活性的可視化和測(cè)定對(duì)體內(nèi) MPs 生物降解的響應(yīng)。


本文進(jìn)一步評(píng)估了黃粉蟲幼蟲中腸道內(nèi)酸化水平的變化與體內(nèi) MPs 生物降解的關(guān)系(圖 5)。結(jié)果表明,黃粉蟲幼蟲可以本能地調(diào)節(jié)其在消化系統(tǒng)內(nèi)的內(nèi)部環(huán)境,以響應(yīng)各種MPs聚合物的體內(nèi)生物降解。PVC喂養(yǎng)組的酸化水平最高,明顯高于PE喂養(yǎng)和PLA喂養(yǎng)的幼蟲(p < 0.005)。嚴(yán)重的腸道酸化可能會(huì)阻礙幼蟲消化系統(tǒng)內(nèi)PVC聚合物的去除,并進(jìn)一步促進(jìn)含氯中間體的釋放。這反過(guò)來(lái)會(huì)降低PVC MPs的去除效率,并導(dǎo)致降解速率常數(shù)降低。腸道酸化升高可能會(huì)損害腸道穩(wěn)定性和免疫力,從而增加生物體內(nèi)對(duì)外源性物質(zhì)或應(yīng)激因素的易感性。這些影響可能對(duì)腸道微生物群有害。另一方面,PVC喂養(yǎng)幼蟲中腸后中腸酸化最為明顯,顯著高于前中腸。這種差異意味著腸道對(duì)PVC MPs的消化和生物降解的反應(yīng)存在異質(zhì)性,用PE和PLA MPs喂養(yǎng)的幼蟲中發(fā)現(xiàn)了類似的異質(zhì)性反應(yīng)。PLA喂養(yǎng)的幼蟲在腸道中的酸化最為溫和,可能與黃粉蟲幼蟲對(duì)PLA聚合物的良好消化率和生物相容性有關(guān)。高消化酯酶活性和相對(duì)較低的酸化水平可能有助于昆蟲幼蟲內(nèi)PLA MPs更有效的生物碎裂和降解。

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圖5. 黃粉蟲幼蟲腸道酸化的可視化和測(cè)定對(duì)體內(nèi) MPs 生物降解的響應(yīng)。




四、討論


這項(xiàng)研究為黃粉蟲幼蟲體內(nèi)MPs生物降解相關(guān)的生物碎裂過(guò)程、降解動(dòng)力學(xué)和腸道反應(yīng)提供了重要的見解。與持久的 MPs(例如 PE 和 PVC)相比,可降解的 MPs(例如 PLA)可能在塑料降解昆蟲幼蟲的腸道保留過(guò)程中表現(xiàn)出更快的腸道生物碎片化和更高的消化清除效率。塑料降解昆蟲 黃粉蟲 幼蟲中 MPs 的生物碎裂和相互作用在前中腸滯留期間顯著發(fā)生,導(dǎo)致產(chǎn)生具有更高比表面積和表面反應(yīng)能的較小尺寸的塑料顆粒,然后進(jìn)入后中腸進(jìn)行后續(xù)生物降解。最終,未消化的MPs在幼蟲后腸中形成碎屑顆粒,然后排泄。同時(shí),所有類型的 MPs在幼蟲腸道內(nèi)始終表現(xiàn)出滯留效應(yīng),其中 PVC MPs需要最長(zhǎng)的持續(xù)時(shí)間才能完全去除/消化。


通過(guò)應(yīng)用功能化的生物相容性探針來(lái)研究塑料降解昆蟲幼蟲的腸道反應(yīng)與MPs的體內(nèi)生物降解有關(guān),常規(guī)消化功能酶的水平和分布隨著MPs的生物降解而改變。黃粉蟲 幼蟲可以本能地調(diào)節(jié)它們?cè)谙到y(tǒng)內(nèi)的內(nèi)部環(huán)境(例如,酯酶活性和酸化水平),以響應(yīng)各種類型 MPs 聚合物的體內(nèi)生物降解。PLA喂養(yǎng)的幼蟲后中腸的酯酶活性水平最高,而PVC喂養(yǎng)的幼蟲腸道酸化程度最高。酯酶活性和酸化的內(nèi)在變化可能有助于 MPs 在腸道保留過(guò)程中的消化去除和生物降解。在后中腸和前中腸之間觀察到異質(zhì)性反應(yīng)。這可以歸因于前中腸內(nèi) MPs 生物碎片的發(fā)生,在進(jìn)入后中腸之前產(chǎn)生具有更大比表面積的更小的塑料顆粒。









EMBLab環(huán)境微生物組與生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室

環(huán)境微生物組學(xué)研究環(huán)境中全部微生物及其遺傳信息,其方法學(xué)基礎(chǔ)與理論拓展應(yīng)用是國(guó)際學(xué)術(shù)前沿和熱點(diǎn)。西湖大學(xué)環(huán)境微生物組與生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室開展環(huán)境工程學(xué)與微生物學(xué)交叉學(xué)科研究,研究興趣包括:1)環(huán)境微生物組學(xué)與群落構(gòu)建機(jī)制;2)抗生素耐藥組及病毒組監(jiān)測(cè)與風(fēng)險(xiǎn)阻控;3)新污染物降解轉(zhuǎn)化和健康效應(yīng)。

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鞠峰   EMBLab負(fù)責(zé)人

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鞠峰,西湖大學(xué)特聘研究員、工學(xué)院(環(huán)境學(xué))與生命科學(xué)學(xué)院(生物學(xué))博士生導(dǎo)師、環(huán)境學(xué)科副主任,浙江省杰出青年科學(xué)基金獲得者,長(zhǎng)期從事環(huán)境微生物組學(xué)研究(www.ju-emblab.com),入選斯坦福大學(xué) 2023 和 2022 年度環(huán)境科學(xué)和微生物學(xué)領(lǐng)域"全球前2%頂尖科學(xué)家“榜單。近五年在 Nature Communications、Trends in Microbiology、ISME J、Environmental Science & Technology、Briefings in Bioinformatics等知名期刊發(fā)表通訊作者SCI論文30余篇,承擔(dān)或參與多項(xiàng)國(guó)家自然科學(xué)基金委重點(diǎn)專項(xiàng)、國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目課題?,F(xiàn)任浙江省海岸帶環(huán)境與資源研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室副主任、中國(guó)昆蟲學(xué)會(huì)昆蟲微生物組學(xué)專業(yè)委員會(huì)委員、浙江省生物信息學(xué)學(xué)會(huì)常務(wù)理事、Frontiers in Microbiology 副主編、中國(guó)工程院院刊 Engineering、BMC Microbiology、The Innovation、Environmental Science & Ecotechnology等期刊編委。獲ACS Environmental Au環(huán)境研究新星獎(jiǎng)(2024)、中國(guó)生態(tài)學(xué)會(huì)“微生物生態(tài)青年科技創(chuàng)新獎(jiǎng)-特等獎(jiǎng)”(2018)、香港科學(xué)會(huì)Young Scientist Award(2016)。


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